乔托的第一幅伟大作品是1305年在意大利北部城市帕多瓦完成的，那是一系列的壁画，委托人是当时城中首富恩里科·斯克罗维尼（Enrico Scrovegni）。他是一个臭名昭彰的放贷人，他的父亲还被但丁写进了《神曲》——因为放贷并收取高昂利息而被投入了第七层地狱。斯克罗维尼请乔托为其小礼拜堂作画，希望以此赎罪并光耀门楣。如今，他的石像静静地躺在竞技场礼拜堂的唱诗席上（这座礼拜堂因建造在一座罗马竞技场的废墟之上而得名），正对着乔托留下的传世名画，终于安详地沉入了永眠。
这座礼拜堂的墙壁就像是一本巨大图册的书页，画框中的场景讲述着圣母与圣婴的故事，以及耶稣的童年与死亡经历。每一面墙壁底部都站着寓言人物，共计十四位，分别代表着不同的美德与恶行。故事随着场景的切换逐步展开，《福音书》《黄金传奇》或其他宗教经典都成了故事的来源，而不是道德标准[269]。故事的讲述者——乔托本人——用一种亦真亦幻的语调娓娓道来：画中建筑比例失当，却看似被真实的光线照亮，给人坚实可靠的感觉；画中虚构空间里的光线与投射入礼拜堂的自然光相互映照，二者交融，令画面显得更为真实。乔托在创作帕多瓦壁画时采用了一种新技巧，也就是在新粉刷的墙上直接作画，趁着灰泥尚未干透，一片接着一片地完成画作。颜料与墙壁混杂融合，壁画实质上就成了建筑物的一部分。